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【典型病例報道】冬日里“抱團(tuán)取暖”的紅細(xì)胞——一例高效價冷凝集標(biāo)本發(fā)現(xiàn)記
2025-01-20 09:35:34前 言
在實驗室工作中,確保檢驗質(zhì)量始終是核心議題,為臨床提供精確且可靠的檢驗結(jié)果構(gòu)成了檢驗科工作的核心目標(biāo)與職責(zé)。檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性涉及多個關(guān)鍵環(huán)節(jié),包括檢驗前標(biāo)本的精確采集、檢驗過程中儀器的狀態(tài)及試劑質(zhì)量,以及檢驗后結(jié)果的詳細(xì)審核與分析。尤其是檢驗結(jié)果的審核分析,它在實驗室的整體工作中占據(jù)著至關(guān)重要的地位。通過細(xì)致的審核與分析結(jié)果,能夠及時發(fā)現(xiàn)標(biāo)本中可能出現(xiàn)的異常情況,從而迅速采取措施進(jìn)行糾正,確保最終結(jié)果的準(zhǔn)確性。紅細(xì)胞冷凝集現(xiàn)象是導(dǎo)致血細(xì)胞計數(shù)出現(xiàn)錯誤結(jié)果的重要因素之一,在常規(guī)的檢驗流程中也較為常見。
冷凝集素(Cold Agglutinins, CAS)主要表現(xiàn)為一種針對紅細(xì)胞的自身抗體,其中大部分屬于IgM類型,而少數(shù)為IgG和IgA。這些抗體在低于31℃的溫度環(huán)境下容易與紅細(xì)胞表面的I、i或SP1三種抗原相結(jié)合,從而引發(fā)紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象,通常引起凝集的溫度低于30℃,其最大滴度在4℃時達(dá)到峰值,而當(dāng)溫度升高至37℃時,凝集現(xiàn)象則會消失。冷凝集素主要影響血細(xì)胞分析項目,其產(chǎn)生通常是因為體內(nèi)冷凝集素水平過高,在體外低溫條件下導(dǎo)致紅細(xì)胞自凝,這一現(xiàn)象具有一定的可逆性。當(dāng)患者血常規(guī)樣本出現(xiàn)冷凝集時,可能會導(dǎo)致紅細(xì)胞計數(shù)(Red Blood Cell Count, RBC)、紅細(xì)胞壓積(Hematocrit, HCT)出現(xiàn)假性降低,而平均紅細(xì)胞體積(Mean Corpuscular Volume, MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(Mean Corpuscular Hemoglobin, MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration, MCHC)則可能出現(xiàn)假性升高。此外,文獻(xiàn)中也有報道指出白細(xì)胞和血小板表面存在I/i抗原,因此冷凝集素也會對白細(xì)胞和血小板計數(shù)產(chǎn)生影響,進(jìn)而導(dǎo)致檢驗結(jié)果出現(xiàn)偏差。因此,檢驗人員在審核報告時及時發(fā)現(xiàn)并處理此類情況極為關(guān)鍵。37℃水浴法對于冷凝集素效價較低的樣本基本可以糾正,但對于高效價的冷凝集素樣本,其糾正效果往往不足。近期檢驗科工作中就遇到了一例高效價的冷凝集樣本,我們進(jìn)行了一系列驗證試驗,現(xiàn)與檢驗同行及臨床同仁分享這一過程,共同學(xué)習(xí)與探討。 冬日的某個早晨,一例門診患者的血細(xì)胞分析結(jié)果引起了我的警覺。首先映入眼簾的是這份報告中幼紅細(xì)胞計數(shù)(RBC)、紅細(xì)胞壓積(HCT)和血紅蛋白(HGB)之間的數(shù)值關(guān)系似乎違背了通常所遵循的“三三法則”——即紅細(xì)胞計數(shù)乘以30大致等同于血紅蛋白量,而血紅蛋白量乘以0.3則大致等同于紅細(xì)胞壓積。進(jìn)一步檢查時,我注意到了紅細(xì)胞的直方圖以及相關(guān)的警報信息(如圖2所示)。當(dāng)我拿起那份血液樣本仔細(xì)觀察時,發(fā)現(xiàn)了一個典型的“掛壁現(xiàn)象”,血液中的細(xì)胞呈現(xiàn)出類似細(xì)沙的顆粒狀(如圖3所示)。正是這種凝集現(xiàn)象導(dǎo)致了直方圖的異常變化,并觸發(fā)了相應(yīng)的警報提示。
檢驗科當(dāng)天檢測血常規(guī)的儀器為邁瑞全自動血細(xì)胞分析儀6000PLUS機(jī)型,查看該樣本的儀器檢測信息,數(shù)據(jù)左側(cè)出現(xiàn)多個“R”報警提示,再觀察紅細(xì)胞直方圖右側(cè)另有小幅度起伏,而且報警信息提示:紅細(xì)胞凝集?紅細(xì)胞直方圖異常,大細(xì)胞性紅細(xì)胞。莫非是冷凝集標(biāo)本?不過不能純靠猜,畢竟眼見為實,所以在準(zhǔn)備嘗試37℃溫浴標(biāo)本之前,先拿了一個新采血管將該份標(biāo)本分出來一半放置4℃冰箱冷藏,大約半小時后,薄涂直接鏡檢(高倍鏡10×40倍)果然可見部分紅細(xì)胞成團(tuán)分布(如圖4所示),而正常無冷凝集素血液標(biāo)本即使冷藏后,正常紅細(xì)胞也應(yīng)該是均勻鋪開分布的(如圖5)。
接下來,我們嘗試采用溫浴措施來糾正這一現(xiàn)象。將剩余的標(biāo)本在37℃的溫浴中保持30分鐘后,重新進(jìn)行機(jī)器檢測。然而,檢測結(jié)果顯示情況并未得到改善,數(shù)據(jù)左側(cè)依然頻繁出現(xiàn)“R”報警提示,紅細(xì)胞直方圖右側(cè)的小幅度波動不僅依然存在,甚至比之前更為顯著,右側(cè)的報警信息也有所增加,具體情況如圖6所示。考慮到西北地區(qū)當(dāng)前月份的環(huán)境溫度較低,標(biāo)本在從水浴箱取出到上機(jī)檢測的過程中,很可能再次發(fā)生了冷凝集現(xiàn)象。由此可見,該標(biāo)本中的冷凝集素效價較高,單純的37℃溫浴方法未能有效糾正這一問題。
經(jīng)過四十多分鐘的實驗操作,我正考慮聯(lián)系患者進(jìn)行手指血復(fù)查時,患者因超時未能拿到報告單而前來詢問。于是,我為她采集了末梢血,并采用預(yù)稀釋的方法進(jìn)行檢測。為了確保樣本的溫度,我提前將稀釋液放在手心中保溫,隨后與血液混勻后立即進(jìn)行機(jī)檢。同時,我多擠了一些血液制作了血涂片,以備后續(xù)的染色鏡檢。幸運的是,這次檢測沒有任何報警提示,患者的血小板數(shù)值為77×10^9/L,符合實驗室復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)。通過對剛才制作的血涂片進(jìn)行染色鏡檢,我發(fā)現(xiàn)她的血小板確實較少。報告單備注如下:該患者全血標(biāo)本疑似存在冷凝集抗體干擾,末梢采血已復(fù)檢;末梢血涂片染色鏡檢結(jié)果顯示:血小板散在少見,請結(jié)合臨床情況進(jìn)行分析。
整個過程前后歷時一個小時,最終我順利發(fā)出了這份血常規(guī)報告。值得注意的是,該患者的臨床診斷為“繼發(fā)性血小板減少”。在詢問中得知,她已經(jīng)發(fā)現(xiàn)血小板減少十年,期間一直規(guī)律服藥并定期復(fù)查,血小板數(shù)值時高時低。最近因為感冒,她想順便檢查一下血常規(guī)。我告訴患者,今后如需復(fù)查血小板,應(yīng)主動要求采集末梢血,以降低干擾因素。看到她有些緊張和茫然,我擔(dān)心她無法清楚地向醫(yī)生轉(zhuǎn)述,于是親自陪她去門診開單的醫(yī)生那里,簡單解釋了一下情況,得到了雙方的認(rèn)可與感謝。
相關(guān)知識延伸
冷凝集現(xiàn)象產(chǎn)生原因:
1.支原體感染:支原體肺炎病人感染后第二周冷凝素1:40-1:80或更高,第四周達(dá)高峰。
2.一些自身免疫性溶血性貧血患者可能激發(fā)支原體肺炎,冷凝集素滴度增高。
3.傳染性單核細(xì)胞增多癥、重癥貧血、骨髓瘤、腮腺炎等疾病也可有陽性反應(yīng)。
4.其他感染性疾病。
檢驗人員日常工作中如何識別標(biāo)本中存在冷凝集素?
1. 直接觀察標(biāo)本性狀,管壁發(fā)現(xiàn)有細(xì)沙樣的顆粒?;?qū)颖镜蔚讲F嫌^察,血樣本呈現(xiàn)沙礫樣。
2.血常規(guī)疑似冷凝集的結(jié)果主要表現(xiàn)在RBC、HGB、HCT三者明顯不成比例,RBC、HCT假性降低,并由此造成MCH和MCHC計數(shù)值異常增高。儀器的報警包括混濁、紅細(xì)胞凝集和大細(xì)胞性紅細(xì)胞;再看紅細(xì)胞直方圖,在遠(yuǎn)離正常紅細(xì)胞峰的地方還有一個小的紅細(xì)胞峰,這也提示可能存在紅細(xì)胞凝集。
3.一些非常弱冷凝集或者患者體內(nèi)的冷凝集素還處于緩慢的進(jìn)展期時,檢測人員肉眼無法觀察到明顯細(xì)沙狀時,此刻應(yīng)該關(guān)注血液分析儀檢測結(jié)果的報警信息來進(jìn)行綜合分析,也可以通過以下方式驗證:將樣本放置于4℃冰箱30分鐘后,肉眼查看標(biāo)本有無砂礫狀或顯微鏡下查看有無明顯的紅細(xì)胞聚集現(xiàn)象(放入37℃水浴箱半小時后凝集現(xiàn)象明顯減輕或消失)。
秋冬季節(jié)為冷凝集高發(fā)季節(jié),這可能與外界環(huán)境溫度有關(guān)。冷凝集標(biāo)本對其他結(jié)果也會造成影響,如血型、血沉、對交叉配血也會產(chǎn)生一定干擾,由于屬于抗體介導(dǎo)的自身凝集,不消耗凝血因子,因此對凝血功能影響不明顯。
總結(jié)與分享
如今,隨著科學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展,檢驗設(shè)備的自動化程度越來越高,我們檢驗人員在日常工作中處理標(biāo)本的時候,往往容易忽略標(biāo)本上機(jī)前的狀態(tài)。
檢驗人員在日常工作中應(yīng)當(dāng)多加積累,首先了解儀器性能,其次掌握血常規(guī)各種直方圖、散點圖、報警信息等,熟知實驗室復(fù)檢規(guī)則并嚴(yán)格執(zhí)行,不斷學(xué)習(xí)檢驗和臨床相關(guān)知識,并與患者和臨床保持密切溝通,才能給患者和臨床提供更準(zhǔn)確的檢驗結(jié)果,和更多有效信息,更好地服務(wù)于臨床醫(yī)生和患者,同時也能實現(xiàn)檢驗價值。
文/圖:格爾木支醫(yī)隊 李琰男
審核:劉唐春 李翔